gre URI http://hdl.handle.net/10795/3393 βιολογία γενετική έντομο Σκοπό της παρούσας διδακτορικής διατριβής αποτέλεσε η μελέτη της «αρχιτεκτονικής» των υποκινητών, δηλαδή πώς συνδράμουν στην αναπτυξιακή εξειδίκευση της έκφρασης των γονιδίων του χορίου οι συγκεκριμένες θέσεις πρόσδεσης μεταγραφικών παραγόντων (C/EBP, GATA, HMGA, CHD1), ο προσανατολισμός τους, ο αριθμός τους ακόμα και οι μεταξύ τους σχετικές αποστάσεις. Ως βασική μέθοδο προσέγγισης, επιλέξαμε την τεχνική της ηλεκτροδιάτρησης (electroporation) μέσω της οποίας καθίσταται εφικτή η επιτυχής εισαγωγή και έκφραση γονιδιακών κατασκευών στα επιθηλιακά κύτταρα των ωοθυλακίων του μεταξοσκώληκα Bombyx mori. Οι κατασκευές αυτές είναι τμήματα ανασυνδυασμένου DNA που περιέχουν το γονίδιο αναφοράς lacZ, υπό τον έλεγχο άρτιων ή/και τροποποιημένων υποκινητών αντιπροσωπευτικών γονιδίων του χορίου. Η όλη προσέγγιση προσομοιάζει την in vivo κατάσταση. Από την παρούσα διατριβή προέκυψε ένα αναθεωρημένο πρότυπο για τη σωστή αναπτυξιακή ρύθμιση των Α/Β.L9 γονιδίων. Το πρότυπο αυτό περιλαμβάνει ένα αυστηρό πρόγραμμα πρόσδεσης -των προαναφερθέντων- μεταγραφικών παραγόντων σε συγκεκριμένα cis-ρυθμιστικά στοιχεία, των οποίων η προσβασιμότητα εξαρτάται από δύο νουκλεοσώματα, παρόντα στον υποκινητή. The primary aim of this thesis was to investigate how promoter “architecture” (number, orientation and position of transcriptional factor - C/EBP, GATA, HMGA, CHD1- binding sites) facilitates developmentally accurate chorion gene regulation. Towards this purpose, several mutated (and non-mutated) promoter regions of different developmental specificity chorion genes, were cloned upstream of a reporter gene (lacZ) to introduce these plasmid constructs into silkmoth follicle epithelial cells via electroporation as an efficient and quick method for transient expression (on ex vivo developing follicles). In this thesis, a revised model is proposed for the developmentally accurate regulation of the A/B.L9 chorion genes. This model comprises a strict binding “program” of the previously mentioned transcription factors on cis-regulatory elements, whose access is dependent on two nucleosomes located on the promoter. 182 pp. LOMv1.0 creator LOMv1.0educational validator LOMv1.0 Scientific Coordinator LOMv1.0 Project Executing Organisation 2014-12-15 Digital Library of the Operational Programme "Education and Lifelong Learning" abstract types Text Μεταξοσκώληκες Bombyx mori Hλεκτροδιάτρηση Γονίδια Ωοθυλάκια Χορίο Υποκινητές γονιδίων 4462512 application/pdf http://repository.edulll.gr/edulll/bitstream/10795/3393/2/3393_1.9_%ce%94%ce%94_15_12_14.pdf Περιλαμβάνεται λίστα με δημοσιεύσεις του συγγραφέα της διατριβής σε επιστημονικά περιοδικά και ανακοινώσεις σε διεθνή συνέδρια, καθώς επίσης και κάποια άρθρα σε επιστημονικά περιοδικά. URI http://hdl.handle.net/10795/3393 LOMv1.0creator 2016-05-25T08:38:58Z LOMv1.0validator 2016-05-25T08:38:58Z LOMv1.0 gre no no Copyright EYD-EPEDBM (Operational Programme "Education and Lifelong Learning")